Clostridial diseases diagnosed in cattle from the South of Rio Grande do Sul, Brazil. A forty-year survey (1978-2018) and a brief review of the literature / Clostridioses diagnosticadas em bovinos no sul do Rio Grande do Sul. Uma pesquisa de quarenta anos (1978-2018) e breve revisão da literatura

Clostridial diseases are important causes of livestock losses in the southern Rio Grande do Sul. Since 1978 annual surveys conducted at the "Laboratório Regional de Diagnóstico" of the "Universidade Federal de Pelotas" (LRD-UFPel) have shown that clostridial diseases represent 10.40% of the bacterial diseases diagnosed in cattle and 1.65% of all diseases diagnosis in cattle over a 40-year period. The purpose of this study is to review the clinical, epidemiological and pathological aspects of the clostridial diseases diagnosed in cattle from January 1978 to December 2018 at the LRD-UFPel in the hopes that it will constitute a useful guide for field veterinary practitioners and interested farmers. We assessed and review the necropsy protocols of 6,736 cattle; these necropsies were performed either by LRD-UFPel faculty or by field veterinary practitioners; 111 outbreaks (1.65%) were diagnosed as clostridial disease, distributed as follows: 35 outbreaks of tetanus, 34 of blackleg, 23 of bacillary hemoglobinuria, 11 of malignant edema (gas gangrene), and eight of botulism. Approximately 904, from a total of 42,480 cattle at risk, died in these outbreaks.(AU)

Clostridioses são doenças produzidas por alguma das espécies do gênero Clostridium e são importantes causas de perdas pecuárias no sul do Rio Grande do Sul. Pesquisas anuais realizadas no Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (LRD-UFPel) desde 1978 demonstraram que as clostridioses representaram 11,1% das doenças bacterianas diagnosticadas em bovinos e 1,65% de todos os diagnósticos de doenças em bovinos ao longo de 40 anos. O objetivo deste estudo é revisar os aspectos clínicos, epidemiológicos e patológicos das clostridioses diagnosticadas de janeiro de 1978 a dezembro de 2018, pelo LRD/UFPel com a intenção de que esse trabalho possa servir de guia útil para os veterinários de campo e fazendeiros interessados. Foram avaliados e revisados os protocolos de necropsia de 6.736 bovinos; essas necropsias foram realizadas pelo pessoal do LRD/UFPel ou por veterinários de campo. Cento e quatro (1,16%) casos foram diagnosticados como clostridioses, distribuídos da seguinte forma: 35 surtos de tétano, 34 de carbúnculo sintomático, 23 de hemoglobinúria bacilar, 11 de edema maligno (gangrena gasosa) e oito de botulismo. Aproximadamente 904, de um total de 42.480 bovinos sob-risco, morreram nesses surtos.(AU)

Jürgen Döbereiner: a life dedicated to science / Jürgen Döbereiner: uma vida dedicada à ciência

Dr. Jürgen Döbereiner was born in Germany, on the 1st of November 1923, and lived in Brazil for 68 years during which time he developed a range of scientific projects in veterinary pathology and related disciplines. His main interests were the identification of new poisonous plants and mineral deficiencies and the causes of "cara inchada" ("swollen face" a periodontal disease) and botulism in livestock. This research has resulted in the improved health and saving of hundreds of thousands of animals, mainly cattle, annually, and is consequently of enormous economic value to the country. This contribution remains largely under appreciated. He was also involved in organizing diagnostic methods for identifying infectious diseases such as African swine fever and glanders in horses. One of his other major achievements has been the foundation and editing of specialized scientific journals for the documentation of veterinary science research results. At the beginning of his career in the 1950s, he and colleagues from the Institute for Animal Biology (IBA) were struggling to find a national scientific journal where research results from veterinary medicine could be published with practical application to the Brazilian reality. In consequence, the team founded "Arquivos do Instituto de Biologia Animal" and published three volumes (1959-1961). He then founded and edited "Pesquisa Agropecuária Brasileira" (The Brazilian Journal of Agricultural Research") that included a veterinary section. A series of veterinary volumes were published (1966-1976). Finally, in 1978 he helped create the Brazilian College of Veterinary Pathology (CBPA) that published "Pesquisa Veterinária Brasileira" (The Brazilian Journal of Veterinary Research) from 1981. The main goal was to communicate the most relevant disease problems of Brazilian livestock, in particular pathology and related subjects such as epidemiology, clinical study series and laboratory diagnosis to field veterinarians and academics. Dr. Jürgen Döbereiner was president of CBPA (1978-2018) and chief editor of "Pesquisa Veterinária Brasileira" (1981-2018). He passed away on the 16th of October, 2018, at the age of 94 at his home in Seropédica/RJ, Brazil.(AU)

Dr. Jürgen Döbereiner nasceu na Alemanha em 1 de novembro de 1923, durante 68 anos viveu no Brasil e desenvolveu trabalhos científicos no campo da patologia veterinária latu sensu. Sua contribuição científica de destaque foi em temas como plantas tóxicas de interesse pecuário, deficiências minerais em animais de produção, cara inchada (doença periodontal) dos ruminantes, botulismo e diagnóstico de doenças infecciosas. Estas pesquisas resultaram na melhoria da saúde e de centenas de milhares de animais, principalmente bovinos e, consequentemente, foram de enorme valor econômico para o país. Esta contribuição ainda permanece em grande parte subestimada. De grande destaque para a ciência brasileira foi ainda a sua atuação profissional na documentação científica de resultados de pesquisa. No início de sua carreira na década de 1950, Dr. Döbereiner e outros pesquisadores do Instituto de Biologia Animal (IBA) detectaram a necessidade de um periódico científico nacional para publicar resultados de pesquisas com aplicação pratica à realidade brasileira. Dessa iniciativa surgiram os Arquivos do Instituto de Biologia Animal, que publicou três fascículos (1959-1961), em seguida o Dr. Jürgen Döbereiner participou na fundação da revista Pesquisa Agropecuária Brasileira que publicou a Série Veterinária (1966-1976) e finalmente em 1978, houve a fundação do Colégio Brasileiro de Patologia Animal (CBPA) que publica desde 1981 a revista Pesquisa Veterinária Brasileira. Este periódico científico foi criado para apresentar à comunidade, principalmente veterinários de campo e professores, os principais problemas de saúde em animais de produção no Brasil, ou seja, patologia em seu sentido amplo, envolvendo as áreas de epidemiologia, clínica e diagnóstico laboratorial. Dr. Jürgen Döbereiner, que foi presidente do CBPA (1978-2018) e Editor-Chefe da revista Pesquisa Veterinária Brasileira (1981-2018), faleceu em casa, em 16 de outubro de 2018, aos 94 anos, no município de Seropédica/RJ.(AU)

Type C waterborne botulism outbreaks in buffaloes (Bubalus bubalis) in the Amazon region / Surtos de botulismo hídrico tipo C em búfalos (Bubalus bubalis) na região amazônica

Botulism is a poisoning caused by botulinum neurotoxins (BoNTs). BoNTs serotypes C and D are involved in botulism outbreaks in cattle in several countries. Despite the high number of buffaloes worldwide, the real impact of botulism in buffaloes is not known, because it is not a notifiable disease in Brazil and only few studies have evaluated the occurrence of the disease in buffaloes. Those studies did not conduct diagnostic tests to confirm the presence of BoNTs. The objective of the present study was to describe three outbreaks of botulism in buffaloes in the Brazilian Amazon region considering epidemiological and clinical data as well as laboratory diagnosis to confirm the presence of BoNTs. The results of the bioassay were negative in the tissues and in feed samples, but positive for BoNT C in water samples. Confirmation of the occurrence of botulism in buffaloes allows the implementation of preventive strategies in susceptible herds. Waterborne botulism in buffaloes is prevented by ensuring the constant circulation of water collections and restricting the presence of dead animals and bones in order to prevent the accumulation of organic matter and the development of anaerobic conditions, which might favor the replication of Clostridium botulinum. Another measure that can be adopted is the shading of the pasture, in order to maintain the thermal comfort for the buffaloes and to avoid the excess of permanence of them in the water pools.(AU)

Botulismo é uma intoxicação causada por neurotoxinas botulínicas (BoNTs). Os sorotipos C e D de BoNTs estão envolvidos em surtos de botulismo em bovídeos em vários países. Apesar do elevado número de búfalos em todo o mundo, o real impacto do botulismo em búfalos não é conhecido; pois não é uma doença de notificação obrigatória no Brasil e poucos estudos avaliaram a incidência desta doença em búfalos. Além disso, estes estudos não realizaram testes diagnósticos para confirmar a presença de BoNTs. O objetivo do presente estudo foi descrever três surtos de botulismo em búfalos na região amazônica brasileira, considerando dados epidemiológicos e clínicos, bem como o diagnóstico laboratorial para confirmar a presença de BoNTs. Os resultados do bioensaio em camundongos foram negativos em todos os tecidos e nas amostras de alimentos testados; no entanto foram positivos para BoNT C nas amostras de água. A confirmação da ocorrência de botulismo em búfalos permite a implementação de estratégias preventivas nos rebanhos. O botulismo hídrico nos búfalos pode ser prevenido assegurando-se que coleções de água fossem mantidas limpas, sem a presença de animais mortos e ossadas no seu interior e não permitindo o acúmulo de matéria orgânica e condições de anaerobiose favoráveis à multiplicação de Clostridium. botulinum. Outra medida que pode ser adotada é o sombreamento das pastagens, a fim de manter o conforto térmico dos búfalos e assim evitar o excesso de sua permanência dentro das fontes de água.(AU)

Enfermidades em bovinos associadas ao consumo de resíduos de cervejaria / Cattle diseases associated with consumption of beer residues

A utilização de subprodutos de cervejaria na alimentação de bovinos tem crescido nos últimos anos como uma excelente alternativa na manutenção ou aumento da produtividade na bovinocultura, sobretudo na Região Sudeste. Entre os resíduos mais empregados estão o bagaço de malte oriundo da "cevada" e o "levedo de cerveja", um subproduto líquido que contém álcool, muito utilizado no Estado do Rio de Janeiro. O uso incorreto ou sem os devidos cuidados, bem como o armazenamento de forma inadequada, contudo, podem ser responsáveis por quadros de intoxicação por etanol, neurotoxicose por Aspergillus clavatus, acidose ruminal e botulismo. Esse trabalho tem por intuito alertar para a importância dessas condições como causa de sérios prejuízos econômicos à pecuária e fornecer subsídios para o estabelecimento do diagnóstico, diagnóstico diferencial e profilaxia das mesmas...

The use of brewery by-products in cattle feed has grown in recent years as an excellent alternative for maintenance or increase in cattle productivity especially in Southeastern Brazil. Among the most employed by-products are malted barley waste and brewer's yeast, a liquid by-product that contains alcohol and is widely used in the State of Rio de Janeiro. Careless or incorrect use of these products, as well as inadequate storage, can cause ethanol poisoning, neurotoxicosis by Aspergillus clavatus, ruminal acidosis and botulism. This paper highlights the importance of these conditions as causes of severe economic losses to livestock, and provides support for the establishment of diagnosis, differential diagnosis and prophylaxis...

Evitando erros de diagnóstico em pacientes com paraparesia/plegia aguda com ênfase no botulismo / Avoiding misdiagnosis in patients with acute paresis/paralysis with emphasis on botulism

[...] Mortes envolvendo botulismo geralmente estão relacionadas com a falha em reconhecer a doença e a gravidade, refletindo no retardo em iniciar a terapia, seja esta suporte ou específica (BARSANTI, apud GREENE, 2006). A diferenciação dos casos é extremamente importante, assim o objetivo geral foi o de criar um sistema padrão para abordagem clínica primária em casos de manifestações neuromusculares agudas, evitando erros de diagnóstico nesse tipo de emergências neurológicas, focado no diagnóstico de botulismo.

Type C botulism in swine fed on restaurant waste / Botulismo tipo C em suínos alimentados com restos de restaurante

Descreve-se a epidemiologia da morte de suínos ocorrida entre 2002 e 2009 pela ingestão da neurotoxina botulínica do tipo C. A neurotoxina presente em resíduos de alimentos provenientes de cozinhas de restaurantes e hotéis, armazenados em tonéis sem abrigo do sol e administrado em cocho coletivo sem tratamento térmico prévio. Animais de diferentes idades morreram com sinais clínicos de botulismo caracterizados por paralisia flácida, emagrecimento, anorexia, fraqueza, incoordenação, dificuldade de locomoção com evolução para decúbito lateral com micção e defecação involuntárias. Nenhuma alteração evidente foi observada na necropsia e no exame histológico. O teste de bioensaio com soroneutralização em camundongos foi realizado com amostras de conteúdo intestinal dos animais afetados e alimentos e revelou a presença de grandes quantidades de toxina botulínica do tipo C.

The paper addresses the epidemiologic data of the death of pigs during the period of 2002 to 2009 following the ingestion of botulinum neurotoxin type C. This neurotoxin was present in food residues originating from restaurant and hotel kitchens, stored in barrels without shelter from the sun and administered in a collective trough without prior thermal treatment. Animals which died at different ages showed clinical signs of botulism characterized by flaccid paralysis, weight loss, anorexia, weakness, lack of coordination, locomotion difficulties with the evolution of lateral recumbency with involuntary urination and defecation. No alterations were observed at postmortem and histological examination. The bioassay with serum neutralization in mice was carried out on samples of intestinal contents from pigs affected and revealed the presence of large quantities of botulinum toxin type C.

Botulismo em bovinos leiteiros no Sul de Minas Gerais, Brasil / Botulism in dairy cattle in southern Minas Gerais, Brazil

Neste trabalho descreve-se um surto de botulismo decorrente da ingestão de milho contaminado em um sistema de produção de leite, em regime de confinamento, na região Sul de Minas Gerais. O rebanho era composto por 148 vacas holandesas lactantes de alta produção, confinadas em tempo integral e alimentadas com dieta completa, composta de silagem de milho e concentrado. Foram afetados 38 bovinos, verificando-se letalidade de 100 por cento. Amostras de conteúdo intestinal, ruminal e fígado de sete animais necropsiados e amostras de água dos bebedouros e do milho utilizado na alimentação foram submetidas ao bioensaio e à soroneutralização para a detecção de toxina botulínica. Toxinas dos tipos C e D foram detectadas nas amostras de conteúdo intestinal, ruminal e milho. O surto descrito mostra que o milho estocado em condições inadequadas pode ser um fator de risco para a ocorrência da doença.

An outbreak of bovine botulism in a dairy herd caused by ingestion of contaminated maize, in southern Minas Gerais, Brazil is described. The herd was composed by 148 lactating cows of high milk production fed with diet based on maize ensilage and concentrate in a free stall system. Thirty eight cows were affected, with 100 percent of fatality rate. Samples from intestine, rumen and liver of necropsied cattle and drinking water and maize were submitted to the mouse bioassay and soroneutralization tests for detection of Clostridium botulinum toxins. Types C and D toxins were detected in samples from intestinal and rumen contents and maize. The reporter of an outbreak of botulism in cattle associated with an unusual source of toxin, shows that stocked maize in inadequate conditions is a factor of risk for the occurrence of the botulism in dairy cattle.

Botulismo em bovinos de corte e leite alimentados com cama de frango / Botulism in beef and dairy cattle fed with poultry litter

Surtos de botulismo causados pelos tipos C e D da toxina botulínica são freqüentes no país, estando originalmente associados à osteofagia e à ingestão de alimentos e água contaminados. No presente trabalho são descritos os aspectos epidemiológicos, clínico-patológicos e laboratoriais de sete surtos da intoxicação em bovinos de corte e leite alimentados com cama de frango, ocorridos nos estados de São Paulo e Minas Gerais entre 1989 e 2000. Cinco surtos ocorreram em rebanhos de corte confinados ou criados extensivamente e suplementados com o subproduto, e dois em propriedades leiteiras. De um total de 1.535 animais alimentados regularmente com a cama de frango, 455 (29,64 por cento) morreram em um período que variou de 2 a 4 semanas. A morbidade nos sete surtos estudados variou de 3,47 a 100 por cento, da mesma forma que a mortalidade. Em uma das propriedades a letalidade foi de 60,52 por cento, e em todos os outros surtos ela foi acima de 88,43 por cento; em três propriedades o coeficiente foi de 100 por cento. Os sinais clínicos de paralisia progressiva, dificuldade na locomoção, decúbito e estado mental aparentemente normal, diminuição do tônus da musculatura da língua e cauda, sialorréia e dificuldade respiratória caracterizaram o quadro clínico. A necropsia de 30 animais não foi observada qualquer alteração macroscópica digna de nota. A presença de esporos de Clostridium botulinum foi detectada em amostras de cama de frango colhidas nas sete propriedades. Nas amostras de fígado, líquido ruminal e intestinal, provenientes dos 30 animais necropsiados, foi possível detectar toxinas botulínicas tipos C (5) ou D (9), ou classificada como pertencente ao complexo CD (1), em pelos menos um dos materiais provenientes de 15 animais, confirmando assim o diagnóstico clínico-patológico e epidemiológico de botulismo.

Causas de muerte súbita en bovinos en pastoreo en las sabanas de América Tropical / Causes of sudden death in cattle grazing in the savannas of Tropical America

En este artículo se realiza una breve revisión acerca de la epidemiología y causas de la muerte súbita de los bovinos mantenidos en condiciones de pastoreo en América Tropical. Se define la muerte súbita como la condición donde los animales aparecen muertos de forma repentina o bien poseen una enfermedad de muy corto curso; situación bajo la cual no se da tiempo para el desarrollo de lesiones patológicas, dificultando el diagnóstico, el cual debe basarse en la recolección de evidencia epidemiológica. Se destaca como factor predisponente para estas patologías, a las condiciones edafológicas de las sabanas tropicales, principalmente en lo que refiere a las limitaciones nutricionales y de balance mineral de animales y plantas. Dentro de un listado de posibles agentes etiológicos asociados con este tipo de cuadro clínico en rumiantes en pastoreo, se discute el conocimiento epidemiológico y las herramientas diagnósticas a las que se debe recurrir para aclarar la etiología y naturaleza de la situación de mortalidad que afrentan nuestros ganaderos.

Hallazgos histopatológicos en bovinos naturalmente afectados por el síndrome neuroparalítico en la Orinoquía colombiana / Histopathological changes in naturally affected bovine by Neuroparalytic Sindrome in Colombian Orinoquía

Como parte de un estudio epidemiológico longitudinal desarrollado en la Altillanura del departamento del Meta durante un año (1998-1999), y con el fin de determinar alteraciones de patología macroscópica y cambios histopatológicos asociados al Síndrome Neuroparalítico Bovino (SNB), se estudiaron 39 bovinos entre 2 y 8 años de edad, los cuales se encontraban afectados naturalmente por esta causa. Se procesaron muestras de 305 tejidos por la técnica de inclusión en parafina, para determinar las principales lesiones histopatológicas. En la necropsia los hallazgos más importantes fueron la presencia de cuerpos extraños (huesos, arcilla, piedras, madera) en el rumen y retículo; en la mayoría de los casos ocurrió compactación del librillo y vesícula biliar pletórica. La congestión de envolturas cerebrales fue una alteración común en todos los casos. Los hallazgos histopatológicos más relevantes incluyeron cambios vasculares en tejido nervioso, dados por edema, congestión, hemorragia e hiperplasia de células endoteliales; cambios grasos intracitoplasmáticos y megalocitosis en hepatocitos; en el riñón, infiltrados mononucleares en glomérulos y túbulos contorneados con vacuolización intracitoplasmática; hialinización y fragmentación de miofibrillas en músculo estriado esquelético y presencia de Sarcocystis bovis y necrosis de Zenker en músculo estriado cardiaco. Se confirma que el Botulismo bovino no produce alteraciones microscópicas de valor; las otras alteraciones son compatibles con NeurotoxicidadRetardada por Pesticidas, deficiencias energéticas y leptospirosis.

Botulismo bovino: comprovaçäo laboratorial do diagnóstico clínico, período 1986-1989 / Bovine botulism: laboratorial confirmation of clinical diagnosis during the period 1986-1989

Num período de 4 anos (1986-1989) foram processados 517 materiais correspondentes a 235 casos com diagnóstico clínico de botulismo de bovinos, dos Estados de Säo Paulo, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Minas Gerais, Goiás, Bahia, Pará, Maranhäo, Distrito Federal e Roraima (Brasil). Exames laboratoriais foram realizados com o intuito de confirmar a suspeita clínica, detectando a toxina nos materiais correspondentes aos casos supracitados. Os tipos de toxina verificados foram "C" e "D" presentes no fígado e conteúdos de estômago e intestinos, que perfaziam o maior número das amostras remetidas. O pequeno número de casos confirmados leva à suposiçäo de que outras enfermidades devem estar envolvidas nessas mortes, ainda que se considere possíveis resultados falso negativos

Botulismo em bovinos confinados provocado pelo consumo de cama de frango contaminada / Botulism in confined bovine caused by the intake contamined poultry litter

O Botulismo é caracterizada por paralisia parcial ou completa dos músculos de locomoçäo, mastigaçäo e deglutinaçäo como resultado da ingestäo de toxinas pré-formadas do C. botulinum. No Brasil, vários casos de botulismo, pelo consumo de restos de carcaça, têm sido descritos (TOKARNIA et al, 1970; SCHOCKEN-ITURRINO, et al, 1990), porém este é o primeiro relato de botulismo em bovinos confinados pelo consumo de cama de frango. Examinaram-se amostras de cama de frango fornecidos em um confinamento, situado no Município de Jaboticabal-SP, onde tinham morrido vários animais com sintomas sugestivos de botulismo. Amostras dos alimentos fornecidos foram submetidos a análise microbiológica, mascerando-se 500 g das amostras em soluçäo salina estéril. Alíquotas de 0,1 ml da suspensäo foram semeadas em placas de Agar Sangue, Agar MacConkey, Agar Triptose soja e Agar para Clostridios e incubadas a 37§ C por 24 horas em aerobiose e anaerobiose com Sistema Gaspak (BBL). Das mesmas suspensöes foram realizadas também extraçöes de toxinas, em gelatina tamponada. Após centrifugaçäo, foram inoculadas em camundongos. Os resultados mostraram a presença de toxina botulínica do tipo "C", depois da soroneutralizaçäo, com antitoxina botulínica do Instituto Pasteur de Paris. Na cama de frango foram encontrados fragmentos de pé de aves. Este é o primeiro surto de botulismo em bovinos confinados devido a ingestäo de cama de frango

Clostridium botulinum tipos D y A en materiales de necropsia de bovinos afectados por el mal de Aguapey / Clostridium botulinum type D and A in necropsy materials of bovines affected by Aguapey disease

Se realizaron exámenes bacteriológicos en materiales de necropsia de cinco animales muertos con diagnóstico clínico de botulismo bovino, enfermedad enzoótica regional llamada Mal de Aguapey (Provincia de Corrientes). Se identificó C. botulinum tipo D o su toxina en todos los animales, alternativamente en contenidos de rumen, yeyuno, íleon y ciego, y en muestras obtenidas de bazo, riñon e hígado. C. botulinum tipo A fue identificado, respectivamente, en hígado y riñón de dos animales. En los cultivos de cien muestras de diferentes tipos de suelo tomados en el área enzoótica, se identificó toxina butulínica sólo del tipo A en tres y en ninguna tipo D. Estos resultados amplían y confirman los hallazgos previos realizados sobre la etiología botulínica del Mal de Aguapey

Isolamento de bactérias do gênero Clostridium e detecçäo de toxina botulínica a partir de materiais obtidos de bovinos com suspeita clínica de botulismo / Isolation of genus Clostridium bacterias and detection of botulinum toxin from samples obtained of bovine with clinic cases of botulism

Foram analisadas amostras de fragmentos de fígado, conteúdo ruminal, fezes e soro sangüíneo provenientes de 68 casos de bovinos com diagnóstico clínico de botulismo. O objetivo foi a confirmaçäo laboratorial de botulismo, face ao número crescente de casos clínicos suspeitos em nosso meio. Os materiais eram oriundos de bovinos dos Estados de Säo Paulo, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Goiás, Minas Gerais, Pará e Bahia e foram coletados através de necrópsia realizada por veterinários de campo e enviados à Seçäo de Bacteriologia Animal do Instituto Biológico de Säo Paulo da Secretaria da Agricultura e Abastecimento. Foi realizada a extraçäo de toxina botulínica e sua classificaçäo sorológica, bem como o isolamento e identificaçäo de bactérias do gênero Clostridium. A toxina botulínica foi detectada em apenas 2 (2,9%) dos casos, sendo 1 (1,5%) no fígado e classificada no tipo C e em outro (1,5%) no soro sangüíneo e conteúdo ruminal, mas näo pertencente aos tipos C e D. Nesses 2 casos näo foram isoladas cepas de Cl. botulinum. Pelo exame bacteriológico, 30 (44,1%) dos casos estudados foram positivos para o isolamento de cepas do gênero Clostridium, dos quais foram isoladas 23 diferentes espécies do gënero. De 19 (63,3%) dos 30 casos positivos foram obtidas cepas de Clostridium, isoladamente ou em associaçäo, identificadas como espécies classicamente consideradas como agentes patogênicos para bovinos, incluindo o isolamento de Cl. botulinum, embora de apenas um caso. Tais fatos demonstram a necessidade de maiores estudos sobre o assunto que possibilitem posiçöes mais conclusivas sobre a real situaçäo desta doença